無菌室一般是在微生物實驗室內(nèi)專辟一個小房間??梢杂冒宀暮筒AЫㄔ?。面積不宜過大,約 4 — 5 平方米即可,高 2.5 米左右。無菌室外要設一個緩沖間,緩沖間的門和無菌室的門不要朝向同一方向,以免氣流帶進雜菌。無菌室和緩沖間都必須密閉。室內(nèi)裝備的換氣設備必須有空氣過濾裝置。
規(guī)程
1.無菌室應設有無菌操作間和緩沖間,無菌操作間潔凈度應達到10000級,室內(nèi)溫度保持在18-24℃,濕度保持在45-65%。超凈臺潔凈度應達到100級。
2.無菌室應保持清潔,嚴禁堆放雜物,以防污染。
3.嚴防一切器材和培養(yǎng)基污染,已污染者應停止使用。
4.無菌室應備有工作濃度的液,如5%的甲酚溶液,75%的酒精,0.1%的新潔爾滅溶液,等等。
5.無菌室應定期用適宜的液清潔,以保證無菌室的潔凈度符合要求。
6.需要帶入無菌室使用的儀器,器械,平皿等一切物品,均應包扎嚴密,并應經(jīng)過適宜的方法。
7.工作人員進入無菌室前,必須用肥皂或液洗手,然后在緩沖間更換專用工作服,鞋,帽子,口罩和手套(或用75%的乙醇再次擦拭雙手),方可進入無菌室進行操作。
8.無菌室使用前必須打開無菌室的紫外燈輻照30分鐘以上,并且同時打開超凈臺進行吹風。操作完畢,應及時清理無菌室,再用紫外燈輻照30分鐘。
9.供試品在檢查前,應保持外包裝完整,不得開啟,以防污染。檢查前,用75%的酒精棉球外表面。
10.每次操作過程中,均應做陰性對照,以檢查無菌操作的可靠性。
11.吸取菌液時,必須用吸耳球吸取,切勿直接用口接觸吸管。
12.接種針每次使用前后,必須通過火焰灼燒,待冷卻后,方可接種培養(yǎng)物。
13.帶有菌液的吸管,試管,培養(yǎng)皿等器皿應浸泡在盛有5%來蘇爾溶液的桶內(nèi),24小時后取出沖洗。
14.凡帶有活菌的物品,必須經(jīng)后,才能在水下沖洗,嚴禁污染下水道。
準備工作
1. 先進行無菌室空間的,開啟紫外燈30—60分鐘
2. 檢驗用的有關器材, 搬入無菌室前必須分別進會
3. 操作人員必須將手清洗,穿戴好無菌工作衣、帽和鞋,才能進入無菌室
4. 進入無菌室后再一次手部,然后才進行檢驗操作
無菌室內(nèi)天花板應與風管、管道、燈具、風口等的安裝脫開,光滑、無裂縫,易于清洗。無菌室的門窗材料應選擇耐受性好、自然變形小、制造誤差小、容易控制縫隙、氣密性好的材料,采用雙層中空玻璃結構的雙層窗,既節(jié)約空間、又節(jié)約能源,還可以避免玻璃窗結露引起霉變,造成污染;窗盡量采用大玻璃,這樣可減少積灰點,又有利于清潔工作。